细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?

发表日期: 2017-09-11    浏览数: 3073

 

不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。

培养细胞每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。

细胞中心通常使用的消化液浓度为:

(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;

(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。

(3)0.25% 胰蛋白酶

    溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。

    多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。